Tujuan
Mahasiswa diharapkan dapat menentukan dan mengetahui titik isoelektrik (pH isoelektrik) dari suatu protein secara kualitatif.
Dasar Teori
Suatu protein pada umumnya mengandung asam amino bermuatan positif (basa) dan sejumlah lagi bermuatan negative (asam). Pada suatu Ph larutan tertentu, gugus muatan positif suatu protein akan sama dengan gugus yang bermuatan negative; sehingga protein akan bermuatan netral, dikenal dengan pH isoelektrik yang berbeda – beda. Pada Ph isoelektrik, suatu protein sangat mudah diendapkan karena saat itu muatan listriknya nol. Prinsip ini banyak dipakai dalam teknik pemisahan protein dalam suatu campuran karena pH isoelektrik khas untuk setiap protein, sehingga dengan menyesuaikkan pH maka campuran beberapa protein dalam suatu larutan dapat dipisahkan.
Alat & Bahan
1. Tabung Reaksi
2. Rak tabung reaksi
3. Pipet ukur, pipet tetes
4. Penangas air
5. Pengatur waktu
6. Larutan kasein netral
7. Buffer asetat pH : 3,8; 4,7; 5,0; 5,3 dan 5,9.
Cara Kerja
1. Sediakan 5 tabung reaksi yang bersih dan kering, lalu masing – masing diisi dengan larutan kasein netral sebanyak 1 mL.
2. Tambahkan pada setiap tabung 1 mL buffer asetat masing – masing dari pH 3,8; 4,7; 5,0; 5,3 dan 5.9.
3. Kocoklah campuran dengan baik, lalu catat derajat kekeruhanya setelah 0,10 dan 30 menit.
4. Perhatikan hasilnya, yaitu pada tabung berapa terbentuk endapan maksimal.
5. Selanjutnya panaskan sebuah tabung di dalam penangas air.
6. Amati hasilnya. Pembentukan endapan kekeruhan paling cepat atau paling banyak merupakan titik isoelektriknya.
Hasil
Tabung
|
pH
|
Pengamatan endapan sedikit atau banyak
| ||
0 menit
|
10 menit
|
30 menit
| ||
1
|
3,8
|
Keruh terdapat gumpalan
|
Keruh terdapat endapan
|
Keruh terdapat endapan.
|
2
|
4,7
|
Keruh terdapat endapan
|
Keruh terdapat endapan
|
Keruh terdapat endapan
|
3
|
5,0
|
Keruh tidak terdapat endapan
|
Keruh tidak terdapat endapan
|
Keruh tidak terdapat endapan
|
4
|
5,3
|
Sedikit keruh, tidak terdapat endapan
|
Sedikit keruh, tidak terdapat endapan
|
Sedikit keruh tidak terdapat endapan
|
5
|
5,9
|
Sedikit keruh, tidak terdapat endapan
|
Sedikit keruh, tidak terdapat endapan
|
Sedikit keruh, tidak terdapat endapan
|
Pembahasan
Protein (protos yang berarti ”paling utama") adalah senyawa organik kompleks yang mempuyai bobot molekul tinggi yang merupakan polimer dari monomer-monomer asam amino yang dihubungkan satu sama lain dengan ikatan peptida. Peptida dan protein merupakan polimer kondensasi asam amino dengan penghilangan unsur air dari gugus amino dan gugus karboksil. Jika bobot molekul senyawa lebih kecil dari 6.000, biasanya digolongkan sebagai polipeptida.
Proetin banyak terkandung di dalam makanan yang sering dikonsumsi oleh manusia. Seperti pada tempe, tahu, ikan dan lain sebagainya. Secara umum, sumber dari protein adalah dari sumber nabati dan hewani. Protein sangat penting bagi kehidupan organisme pada umumnya, karena ia berfungsi untuk memperbaiki sel-sel tubuh yang rusak dan suplai nutrisi yang dibutuhkan tubuh. Maka, penting bagi kita untuk mengetahui tentang protein dan hal-hal yang berkaitan dengannya.
Oleh karena itu, kegiatan praktikum ini bertujuan untuk mengetahui adanya ikatan peptida dari suatu protein, membuktikan adanya asam amino bebas dalam suatu protein, membuktikan adanya asam amino yang berinti benzena, mengetahui kelarutan protein terhadap suatu pelarut tertentu, dan mengetahui titik isoelektrik dari suatu protein secara kualitatif.
Kesimpulan
Terjadi endapan pada pH 3,8 dan 4,7 sebelum dipanaskan dan setelah dipanaskan kurang lebih 10 menit pada pH 5,0 terjadi sedikit pengendapan terjadi karena banyaknya titik isoelektriknya.
Pertanyaan
Pada pH berapa diperoleh pengendapan kasein maksimal. Mengapa?
Jawab:
Pada pH 3,8 dan 4,7, karena pada pH tersebut terdapat titik isoelektrik dimana protein tidak mempunyai selisih muatan atau jumlah muatan positif dan negative sama, sehingga tidak bergerak jika diletakan dalam medan listrik. Dan pada pH isoelektrik suatu protein sangat mudah diendapkan karena pada saat itu muatan listriknya nol.
Jalip, Ikna Suyatna. 2011. Penuntun Praktikum Biokimia Laboratorium Kimia. Universitas Nasional Jakarta
DAFTAR PUSTAKA
3 comments:
maaf ya..pembahasannya kurang mendalam
sangat membantu
2017 ford fusion hybrid titanium - Tioga Arts
2017 ford fusion hybrid titanium. 2016-03-09 titanium drill bit set 04:39:57. 2020-03-09 05:48:49. 2021-03-09 citizen super titanium armor 05:54:49. 2019-03-09 06:30:44. 2020-03-09 titanium belt buckle 05:52:59. 2020-03-09 06:50:59. 2020-03-09 titanium eyeglasses 05:53:59. 2020-03-09 06:55:59. 2020-03-09 06:56:59. 2019-03-09 08:55:59. 2020-03-09 08:52:58. 2020-03-09 03:55:58. 2020-03-09 titanium banger 03:59:59.
Post a Comment