MEDIA DAN CARA PEMBUATANNYA

Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat – zat hara ( nutriem ) yang berguna untuk membiakkan mikroba. Dengan menggunakan bermacam – macam media dapat dilakukan isolasi, perbanyakan, pengujian sifat – sifat fisiologis dan perhitungan jumlah mikroba.

Supaya mikroba dapat tumbuh baik dalam suatu media, maka medium tersebut harus memenuhi syarat – syarat antara lain :

Media dapat digolongkan berdasarkan atas susunan kimianya, sifat wujudnya dan fungsinya.

         Biji jagung, air suling, agar – agar, ekstrak malt, kentang, dekstrose peptone, cawan Petri, gelas piala, gelas pengaduk, alat pemanas, timbangan analitik, kertas pH, autoklaf, kertas saringan.

Pada praktikum ini dibuat tiga macam media yaitu media yang terbuat dari Potato Dekstrose agar ( Oxoid ), Czapek Dox agar, dan Potato Dekstrak agar ( BBL ).

      Cara pembuatan media dari bahan tersebut ialah dengan menimbang bahan tersebut sebanyak 39 gr, kemudian dilarutkan dengan cara memasaknya dengan air sebanyak 1000 ml (  liter ) sampai air tersebut mendidih. Setelah mendidih kemudian disaring dan dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer dan gelas piala. Tujuan dari dilakukannya penyaringan tadi ialah agar bahan yang dilarutkan tadi jika tidak larut dengan baik atau ada kotoran di dalamnya tidak masuk ke dalam media yang akan dibuat/ disterilkan, sebab jika tidak disaring jika ada kotoran atau bahannya tidak larut dengan baik, saat dijadikan media itu untuk pembiakan mikroba tidak dapat dibedakan mana mikroba dan yang mana kotoran yang terdapat pada media tersebut sehingga harus disiram lebih dahulu. Saat penyaringan larutan tersebut sempat berubah menjadi padatan seperti agar – agar dan larutan itu sendiri berwarna seperti warna krem dan sangat kental sekali.Setelah dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer dan gelas piala sebanyak 600 ml kemudian diukur pH nya, ternyata memiliki pH 6. Karna pH nya terlalu tinggi, maka harus diturunkan dengan penambahan larutan HCL kedalam larutan tersebut sebanyak 5 – 6 tetes kemudian dengan pemberian HCL tersebut pH nya turun menjadi 2. Karna sudah dianggap pH nya rendah, maka Erlenmeyer disumbat dengan kapas dan ditutup dengan kertas aluminium dan kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf untuk disterilkan agar terbebas dari mikroorganisme pengganggu saat digunakan sebagai media pembiakan mikroba nanti.

        Cara membuat media ini adalah dengan menimbang bahan tersebut sebanyak 45,4 gr, kemudian direbus dengan air sebanyak 1000 ml ( 1 liter ), setelah itu diaduk terus sampai larut dan mendidih. Setelah mendidih, kemudian disaring dengan menggunakan kertas saring agar terbebas dari kotoran. Dalam pemanasan terjadi perubahan warna pada air menjadi warna coklat seperti warna teh diseduh. Namun pada saat penyaringan, larutan tersebut sempat dingin dan membentuk padatan seperti agar–agar. Setelah diperoleh larutan tersebut sebanyak 600 ml kemudian diukur pH nya ternyata pH nya mencapai pH 6. Karna larutan ini memiliki pH yang terlalu tinggi maka harus diturunkan dengan cara menambahkan larutan HCL sebanyak 5 tetes. Dengan pemberian HCL tersebut pH nya turun menjadi 4. Jika pH nya terlalu tinggi maka tidak baik untuk dijadikan sebagai media pertumbuhan mikroba. Karna mikroba dapat terjadi kematian.

        Dengan pH 4 maka larutan ini sudah dapat dijadikan sebagai media pertumbuhan mikroba maka selanjutnya media itu disterilkan di dalam autoklaf agar terbebas dari mikroorganisme lain pada saat digunakan untuk pembiakan mikroba. Namun sebelum dimasukkan ke dalam autolaf, larutan dimasukan kedalam Erlenmeyer terlebih dahulu dan ditutup dengan kapas dan kemudian ditutup juga dengan kertas aluminium.

      Untuk membuat media dari bahan tersebut dapat dilakukan dengan cara: Timbang bahan tersebut sebanyak 39 gr, kemudian dilarutkan dengan cara memasaknya dengan air sebanyak 1000 ml ( 1 liter ) sampai mendidih. Setelah mendidih kemudian disaring dengan menggunakan kertas saring dan dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer dan gelas piala. Tujuan dari penyaringan tersebut agar bahan tersebut tidak larut dengan baik bersama air, tidak ikut kedalam media yang akan disterilkan, atau jika pada larutan tersebut ada kotoran akan lebih baik disaring terlebih dahulu sebab jika terdapat kotoran akan sulit membedakannya nanti mana mikroba yang dibiakkan dan kotoran yang terdapat pada media tersebut saat digunakan dalam pembiakan mikroba. Pada saat pemanasan dilakukan bahan tersebut larut dan berubah warna menjadi warna hitam seperti warna kopi dan mengeluarkn bau yang kurang enak. Pada saat penyaringan larutan sempat beku membentuk padatan juga seperti agar – agar. Setelah diperoleh larutan sebanyak 600 ml pH dari larutan itu sendiri adalah 3. Karna pH tersebut tidak terlalu tinggi maka tidak perlu ditambahkan larutan HCL untuk menurunkan pH dari larutan itu sendiri. Oleh sebab itu setelah dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer kemudian disunbat dengan kapas dan kemudian ditutup dengan kertas aluminium.Setelah itu larutan tersebut sudah dapat dimasukkan ke dalam autoklaf untuk disterilkan agar terbebas dari mikroorganisme pengganggu saat digunakan untuk pembiakan mokroba.

Dari hasil dan pembahasan di atas dapat disimpulkan bahwa dalam pembuatan media pembiakan mikroba bisa dibuat dengan cara: Nutrien Agar, Kentang Dekstrosa Agar yang dibuat dari bahan Czapek Dox Agar, Potato Dekstrose Agar ( Oxoid 39 gr ), dan Potato Dekstrose Agar ( BBL 39 gr ). Media tersebut harus diturunkan pH nya menjadi 4 agar mikroba dapat tumbuh dengan baik.

Sebaiknya praktikan diajarkan pula mengenai cara pembuatan medium yang lain. Seperti, Lactose Broth, EMBA (Eosin Methylene Blue Agar), VRBA (Violet Red Bile Agar).